replikációja kromoszómák, messenger RNS -feldolgozás, fordítását a fehérjék, és a kritikus döntések fejlesztés korai szakaszában függ a kölcsönhatás a DNS , RNS és fehérjék. Ezek a kölcsönhatások az alapvető biológiai folyamatok a génexpresszió és a fehérje szintézist. A tudósok gyakran használnak a Saccharomyces cerevisiae, ugyanazon faj élesztő használt sütés és a sör , hogy tanulmányozza a kódoló gének specifikus fehérjék és elemezze a proteinek közötti kölcsönhatások és más molekulák . Az élesztő – hibrid rendszer három egyike a három változatban az élesztő két-hibrid rendszert használnak , hogy tanulmányozzák ezeket a kölcsönhatásokat. A két – hibrid rendszer
A két – hibrid módszerrel detektálására fehérje-fehérje kölcsönhatások által keresett kifejezés a riporter gén . Sok fehérje legalább két domént , vagy különálló szerkezeti és funkcionális egységek . GAL4 , egy fehérje található , Saccharomyces cerevisiae-ben , egy DNS-kötő domén ( DBD ) és egy aktivációs domént ( AD) . Ebben a módszerben, egy hibrid fehérjét fuzionálva DBD és egy második , hogy az AD . Nem riporter gén által kifejezett fúziós csak az egyik a hibridek . Mivel a GAL4 riporter gén csak akkor fejeződik ki, amikor a két hibrid jelen van , fehérje-fehérje kölcsönhatás jelzi .
A három – hibrid rendszer
A három hibrid módszerrel azonosítja egy riporter gén kimutatására a kölcsönhatás a protein RNS-t. Az első hibrid fehérjét tartalmaz egy kondenzált DBD közvetlenül egy RNS -kötő domént . A második az AD áll a GAL4 transzkripciós faktor kapcsolódik egy RNS- kötő fehérje . Az RNS- kötő domének kölcsönhatásba egy hibrid molekula , amely kötődik az RNS két hibrid fehérjék komplexet képez. A komplex képződése váltja expressziójának GAL4 riporter gént. Mivel a riporter gén csak akkor kapcsol be a megalakult a három hibrid komplex jelenlétét jelzi a kölcsönhatás az RNS és a fehérje .
The One – hibrid rendszer
az egy hibrid módszert kimutatására használják a kölcsönhatás a fehérje DNS-sel. Az egy – hibrid technológia egyesíti egyetlen fehérje , amely összeköti az AD közvetlenül a DBD . Ahelyett, hogy azonosítunk egy riporter gént , ez a módszer úgy néz ki, egy adott fehérje, fel kell ismernie, a cél DNS-szekvencia . A jelenléte a specifikus fehérje jelzi a kölcsönhatás a fehérje DNS-sel.
Az Egy- két hibrid rendszer
Az egy- két hibrid módszerrel tanulni fehérje fehérje és fehérje – DNS kölcsönhatások egyszerre. Használata újonnan kifejlesztett élesztő törzsek , ez a módszer alkalmaz a GAL4 riporter gént azonosítani fehérje-fehérje kölcsönhatások és p53 konszenzus azonosítására DNS-fehérje kölcsönhatás. A módszer várhatóan jelentősen növeli a pontosságot a kísérleti eredmények csökkentésével előfordulása hamis pozitív nyert más hibrid rendszerek .
