Mivel a 1880-as években , a Gram-festés teszt továbbra is fontos módszer a baktérium azonosítása és besorolása . Mikrobiológusok gyakran végezze el a Gram- tesztet , mint az első lépés azonosítása bizonyos típusú , rúd alakú baktériumok a Bacillus nemzetség . Gram-festés nevezték el a feltaláló , dán bakteriológus Hans Christian Gram . A technika működik, mert a különbség a Gram-pozitív és Gram negatív baktérium sejtfal fiziológia. Egyes Gram-pozitív pálcák súlyos betegségek, mint például a lépfene és tetanus.Things amire szüksége van
Lab ruházat
Gloves
cipőborító
Kukta
baktérium kolónia
Agar
Petri edények
Víz
beoltása loop
Üveg slide
metanol
Bunsen-égő
Crystal lila folt
jód foltot reagens
Decolorizer
Szafranin
Fuchsin megoldás
nedvszívó papírra
mikroszkóp
Show More utasítások
1
Biztonságos a használata a tiszta, steril laboratóriumi hely , hogy végezzen a Gram-festés tesztet. Viseljen tiszta labor ruházat és cipő burkolatok szennyeződés megelőzése érdekében. Használjon kesztyűt és maszkot kezelésekor baktérium kultúrák. Elkülönítése a kolónia baktériumok a teszt és nőnek ki a tápanyagban gazdag agar Petri-csészében . Sterilizálja a Petri-csésze és agar egy kukta használata előtt .
2
adjunk néhány csepp tiszta vizet a kultúra étel. Ossza meg egyenletesen az agar . Húzzon egy oltás hurok könnyedén az egész agar felszínén . A mintát egy tiszta üveglapra , és kend be egyenletesen a kör alakú terület akkora, mint egy fillért . Tartsa a minta mérete minimális ; meg kell alig képes látni szabad szemmel .
3
Jelentkezzen 95 százalék metanol át a dia kenet két percig , hogy rögzítse a sejteket, és ne torzuljon a morfológia . Air szárítsa meg a dia vagy melegítsük óvatosan egy kis Bunsen-égő láng. Mozgassa a dia -vissza oda a hő egyenletesen és ne helyi forró pontok. Alkalmazza a hő egyenletesen és következetesen. Kerülje a kicsúsztatható a láng , amíg elkészült melegítik .
4
Öntsük kristály lila folt reagens át a fix diát. Hagyjuk állni 30 és 60 másodperc . Mossuk le a foltot csapvízzel néhány másodpercig . Drain a felesleges vizet a csúszda . Fedjük le a dia jód foltot reagenssel 30 és 60 másodperc . Mossuk le a jód csapvízzel . Döntse meg a diát , és adjunk hozzá néhány csepp decolorizer . Alkalmazza , amíg a lefolyás tiszta . Mossuk ki a diát.
5
Áztassuk a slide rózsaszín színű safranin counter – festés reagens 30 másodpercig. Ön helyettesítheti alapvető fuchsin megoldás a safranin . Óvatosan mossa le a dia-és rázza a felesleges vizet . Itassuk szárazra nedvszívó papírra, majd levegővel szárítsa a diát. Vizsgálja meg a készített dia mikroszkóp alatt ellátott fényforrás. Felkutatása és Gram-pozitív baktériumok rudak kék vagy lila elszíneződése a Gram-festés teszt .
