Általában minden egyes DNS molekula belsejében a sejteket tartalmaz két szál össze kölcsönhatás úgynevezett hidrogénkötések . Változás a körülmények , azonban lehet ” denaturálják ” a DNS-t , ami ezeket szálak külön . Hozzáadása erős bázisok , mint a nátrium-hidroxid , drámai módon megnöveli a pH-t , ezzel csökkentve a hidrogénion-koncentráció az oldat és denaturáló kettős szálú DNS-t. A pH hatásai Matton
hidroxid -ion koncentráció és pH közvetlen korreláció, vagyis minél nagyobb a pH-érték , annál nagyobb a koncentráció -hidroxid . Hasonlóképpen , minél alacsonyabb a hidrogénion- koncentráció csökken . A magas pH-érték , akkor az oldat gazdag hidroxid -ionok , és ezek a negatív töltésű ionok a hidrogén ionokat is húzza le a molekulák, mint a DNS- bázispár . Ez a folyamat megzavarja a hidrogénkötések , hogy tartja a két DNS- szálakat , így azok külön .
RNS vs DNA
ellentétben RNS, DNS hiányzik a hidroxil- csoport a 2 ‘ pozíció az egyes cukor- csoportban. Ez a különbség teszi a DNS sokkal stabilabb alkalikus oldatban. Az RNS-t , a hidroxil -csoport a 2 ‘ helyzetben adhat egy hidrogénion az oldatban magas pH-érték, ami egy nagyon reaktív ion- alkoxid , hogy megtámadja a foszfát- csoportot két szomszédos nukleotidot holding együtt . DNS nem szenved ettől a hibát , és így élvezi a figyelemre méltó stabilitást magas pH .
Alkalikuslízis
molekuláris biológusok gyakran élnek lúgos denaturáló elkülöníteni plazmid DNS-t a baktériumoktól. A plazmidok olyan kis hurkok DNS elkülönül a bakteriális kromoszómán. Az alkalikus lízis miniprep , biológusok hozzá mosószert és nátrium- hidroxid- oldatban szuszpendált baktériumokat . A detergens feloldja a bakteriális sejtmembrán , míg a nátrium-hidroxid a pH-t és növeli az oldat teszi erősen lúgos . Mivel a sérült sejtek engedje azok tartalmát , a DNS-t belülről szét alkotóelemeire szálból, vagy denaturálja .
Reannealing
Ha a biológus kivonja a DNS-t a sejt , aki egy újabb reagenst , hogy visszatérjen az oldatot egy semleges pH-n és kicsapódni a mosószert. A változás a pH lehetővé teszi a plazmid szálak reanneal ; A terjedelmes kromoszóma , de nem tudja az azonos, így a biológus is távolítsa el együtt a mosószer , denaturált fehérjék és más válogatott szemét , így a plazmid mögött . Alkalikus lízis nem teljesen tisztítják a plazmid DNS-t; inkább , ez szolgál a ” gyors és piszkos ” módja annak, hogy bontsa ki a cellát , és távolítsa el a legtöbb egyéb szennyeződéseket .
